Đánh giá HMO trong huyết thanh

Tin đăng từ 24.08.2018 đến 22.11.2018 (Đã hết hạn)



Xem bản lưu trữ:
http://raovat.123nhanh.com/Ca-Mau/sach-bao-tap-chi/Danh-gia-HMO-trong-huyet-thanh-d9cd2.html

Đánh giá HMO trong huyết thanh được thực hiện bởi UPLC-MS sau khi chiết chiếc như diễn đạt trước đây (42). Tóm lại, những cái huyết thanh được chiết bằng dung dịch chloroform – metanol hai ml (2: 1) và 0 · 4 ml nước khử ion. Sau khi ly tâm, lớp trên được thu thập, và các protein được kết tủa qua đêm với ethanol lạnh. Dung dịch được ly tâm, và phần nổi phía trên được thu thập, sấy khô và sau chậm tiến độ hòa tan lại trong 0 · 1% NH3 trong nước. các chiết xuất rốt cục một lần nữa được ly tâm, và phần nổi phía trên được tiêm vào UPLC. chiếc nước giải (50 µl) được pha loãng trong nước (khối lượng rốt cục 150 µl), được lọc và ly tâm trong các bộ lọc Amicon (kích thước lỗ: 10 000 K, 14 000 vòng / phút, 30 phút; Merck Millipore) trước khi tiêm.

Đánh giá sắc ký được thực hiện bằng cách dùng cột UPLC BEH Amide (kích thước hạt hai · một × 100-mm, một · 7-μm) trong khoảng Waters. Tốc độ loại chảy là 300 ml / phút, cột được duy trì ở 25 ° C, mẫu ở 20 ° C và thể tích bơm là 1 µl ở chế độ vòng lặp một phần. giai đoạn di động gradient bao gồm 0 · 1% (v / v) dung dịch nước amoniiac (dung môi A) và 0 · 1% (v / v) amoniac trong axetonitril (dung môi B) đã được sử dụng. Điều kiện gradient như sau: 0 · 0–3 · 0 phút, 10–25% A; 3 · 0–8 · 0 phút, 25–40% A; 8 · 0–8 · 1 phút, 40–10% A; và 8 · 1–10 · 0 phút 10% A để ổn định các điều kiện ban đầu. Tổng thời gian chạy là 8 · 1 phút và thời kì trì hoãn sau để điều chỉnh lại cột với 10% A là một · 9 phút. Dung môi yếu là hỗn tạp của 25 ml nước và axetonitril 75 ml, và dung môi mạnh là hổ lốn của 80 ml nước và 20 ml axetonitril. những dung dịch này ổn định trong chí ít một tuần ở nhiệt độ phòng.
Về những điều kiện quang phổ, ion hóa electrospray (ESI) được thực hành ở chế độ ion âm. Khối phổ kế đồng thời được vận hành ở đa dạng chế độ giám sát bức xúc, và tứ cực Q1 và Q3 được thiết lập ở độ phân giải khối công ty. những điều kiện phổ khối lượng được tối ưu hóa cho mỗi hợp chất bằng bí quyết liên tương truyền các dung dịch chuẩn (0 · 1–1 · 0 mg / l). Điện áp phun ESI là 3500 V. N được sử dụng khiến cho khí khử ở 800 l / phút và khí phụ trợ trong hình nón ở mức 50 l / phút. Nhiệt độ của nguồn là 120 ° C, và nhiệt độ phá hủy là 400 ° C. Argon (99% 999% độ tinh khiết) được sử dụng khiến cho khí va chạm với tốc độ xấp xỉ 0 · 13 ml / phút. chọn lựa hai bức xúc phân mảnh cụ thể cho mỗi hợp chất cho phép định lượng và xác định cùng lúc trong một lần chạy, đảm bảo độ đặc hiệu cao của cách. những cặp sau (tiền chất> ion) được chọn để xác định từng hợp chất: (163 · 0> 58 · 9) và (163 · 0> 88 · 9) đối có fucose; (308 · 1> 87 · 0) và (308 · 1> 170 · 1) đối sở hữu axit sialic; (341 · 1> 100 · 9) và (341 · 1> 161 · 1) đối có lactose; (487 · 2> 161 · 0) và (487 · 2> 205 · 0) cho 2'-FL; (632 · 2> 87 · 1) và (632 · 2> 290 · 1) đối có 6'-SL; (632 · 2> 87 · 1) và (632 · 2> 264 · 0) đối với 3'-SL; (706 · 2> 179 · 0) và (706 · 2> 263 · 0) đối sở hữu LNnT. Định lượng được thực hiện bằng bí quyết hiệu chuẩn bên ngoài. ngừng phát hiện chao đảo trong khoảng 5 tới 70 ng / ml và giới hạn định lượng từ 20 đến 200 ng / ml. các khoản chênh lệch giữa ngày và trong ngày rẻ hơn 15%, và mức hồi phục động dao từ 85 đến 115%. Để biết thêm chi tiết, xem Santos-Fandila et al. (42).
Phân tích Thống kê
Nồng độ HMO và con đường can dự được đưa ra dưới dạng giá trị trung bình và độ lệch chuẩn hoặc sai số chuẩn. các khóa học thời kì của 2'-FL, 6'-SL và LNnT trong huyết tương được Phân tích bằng những phép đo lặp lại 2 chiều ANOVA. những khóa học thời kì cho 1 liều được đánh giá bằng những giải pháp lặp đi lặp lại 1 chiều ANOVA. lúc dữ liệu không phù hợp được giả định về tính đồng nhất của những phương sai, những số liệu Báo cáo phi tham số tương ứng đã được tiêu dùng. So sánh sở hữu các giá trị cơ bản đã được thực hiện bởi Dunnett hoặc thử nghiệm của Dunn. những so sánh được ghép nối giữa những giá trị căn bản và những giá trị sau khi các khe rửa được thực hiện bằng phép thử Mann-Whitney. Phần mềm Graph-Pad Prism 5 được dùng để thực hiện những Nhận định.
Liên Hệ:
4.5Đăng ngày: 24.08.2018 | Hết hạn: 22.11.2018 | Đã xem:28 | Thích:0 | Báo xấu:0 | Quan tâm: 7
Google+
Đối tác quảng cáo: Bánh Trung Thu - Vé Máy Bay - Nhà Đất - Thiết kế website - Xe mô hình - Rao vặt - Truyện cười - Phần mềm - Bóng đá - Gái đẹp

63 Tỉnh Thành Phố

Chấp nhận thanh toán qua:
Ngan LuongBao Kim
  • Viettel
  • Vinaphone
  • MobiFone